血型检测技术的发展

红细胞凝集反应技术已有100多年历史，但是该技术的改进和创新一直持续至今。

最早建立检测血型方法是玻片法，而后改进到比较可靠和快速的试管法，这2种方法至今仍然使用。

1978年检测血型的固相技术问世。

1984年建立了筛选抗体固相技术和抗人球试验固相技术，并最终制备出以固相技术为基准的全自动血型检测仪。

1990年Lapierre等人发明了观察红细胞凝集的凝胶技术（gel technique），该技术很快商品化并迅速推广应用到临床输血，并产生了“凝胶试验”（gel test）的专用名词。

1997年到2001年之间，相继发明了使用96微孔板检测血型技术。

1999年开创使用紫外线和可见光分光光度测定方法检测红细胞凝集反应。

2003年Roback等使用流式细胞仪鉴定红细胞抗原。

2006年到2008年之间，集成微流体生物晶片和微流技术用于血型定型。

2008年使用磁性粒子标记的红细胞用于血型血清学技术。

2008年Ramasubramanian等发明光电比色检测红细胞集技术，而后又建立集成光纤微流装置，用于检测凝集反应和血型定型。

凝胶微柱技术

虽然上述包括玻片法和试管法以内的多种技术都可以检测红细胞凝集反应，但是在实际应用的广泛性上应首推凝胶技术。1987年Lapierre等人在公开发表凝胶技术之前，就申请专利并在欧洲开始试用；1995年凝胶技术开始在美国开始使用。

Lapierre等人发明的凝胶技术是将6根微型管柱连接而成一张凝胶卡，管柱中为葡聚糖凝胶颗粒、缓冲液和红细胞特异性抗体，组成一个微型红细胞过滤装置。故凝胶技术又被称为凝胶微柱技术（gel microcolumn technology）或柱凝集技术（column agglutination technology）。

在临床输血领域，凝胶技术主要用于：

（1）ABO血型正定型、ABO血型反定型，Rh血型抗原定型；

（2）直接和间接抗人球蛋白试验；

（3）抗体筛选和抗体特异性鉴定；

（4）ABO和Rh以外血型检测；

（5）新生儿血型和直接抗人球蛋白试验；

（6）血型嵌合体检测；

凝胶技术的优点包括：需要血样量少，受检红细胞一般不需要洗涤，检测凝集反应的灵敏度高，红细胞凝集格局可以维持至少24小时、便于复读结果。此外凝胶技术操作简单，目前已经可以全自动化操作，降低了手工操作误差。凝胶技术的缺点包括：检测速度不如试管方法快，用于抗体鉴定红细胞必须调整到所要求的浓度，受检血样中的纤维蛋白可能干扰红细胞凝集格局等。

进行试验时，将待测红细胞样本配制成适合浓度，加入含有抗体的凝胶微柱中，随后进行离心。如果红细胞抗原和抗体之间未发生特异性凝集反应，红细胞将通过凝胶颗粒的间隙沉降到凝胶管柱底部，呈现一红色小点状；如果发生抗原-抗体反应，红细胞将产生凝集现象。根据红细胞凝块的物理形状，它们可以停留在凝胶基质表面，呈一条红色带状，或呈沙粒状分布在凝胶基质中。根据肉眼观察即可区分是否发生红细胞凝集反应以及凝集反应的强度。